溶酶體活性檢測綠色熒光探針

【??參數信息】

英文名稱：DQ-BSA-Green；Green BSA Lysozyme Assay Kit

中文名稱：溶酶體活性檢測綠色熒光探針

狀態：凍干粉

溶解性：易溶于水、PBS等緩沖液，不溶于有機溶劑（如乙醇、丙酮）

運輸：低溫運輸

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產廠商：西安強化生物科技

【簡單概述】（溶酶體活性檢測綠色熒光探針）

DQ-BSA-Green 溶酶體活性檢測綠色熒光探針是基于牛血清白蛋白（BSA）的熒光溶酶體活性分子探針，使用高濃度的熒光探針對BSA進行標記，標記后的BSA分子由于高濃度的熒光探針存在高度的熒光自抑制現象。

因而本底熒光強度很低，DQ-BSA-Green在正常的活性溶酶體中降解會產生BSA蛋白質片段，使熒光分子濃度變小從而解除染料的自抑制效果，在細胞中發出明亮的熒光。

功能失活的溶酶體則無法降解BSA蛋白，高濃度熒光分子間的自抑作用使得功能失活的溶酶體沒有熒光。

使用DQ-BSA-Green對溶酶體染色更加直觀，可直接進行活細胞成像，免除了制片、染色或者細胞裂解、離心檢測活性等復雜操作。

只需在檢測前6小時將染料加入活細胞中進行染色，6小時后直接成像即可。

DQ-BSA-Green 染料可被內吞進入細胞，水解前具有極低的熒光背景，到達溶酶體水解后能在溶酶體發出特異且明亮的熒光。

同時，染料的熒光光譜峰寬較小，兼容其他蛋白或者波長的染料進行共染色；染料具有較好的光熱穩定性和化學穩定性，在共聚焦顯微鏡下可穩定成像較長時間，相較于lysotrackor在成像過程較穩定。

【使用方法】

（1）凍干粉母液配制

5000rpm 離心以收集可能懸浮于管壁的粉末，于通風棚等無菌環境中，向每支染料加入1.0mL緩沖溶液，顛倒混勻即可快速溶解，復溶后的母溶液為1 mg/mL。

（2）細胞染色

溶解后的儲存液可以10ug/mL 的終濃度直接加入培養中的活細胞中。正常培養 6 小時-12 小時后，更換掉含有染料的培養液即可直接顯微鏡觀察染色情況。

推薦溶酶體活性相關的處理應該早于染料進行，即染料加入前，應該保證溶酶體功能已經被破壞，否則在染色期間仍具有活性的溶酶體還能降解 DQ-BSA-Green，導致部分顯色。

（3）細胞成像

染色后的細胞可直接在熒光顯微鏡下進行活細胞觀察，或者固定后觀察均可，同時，本探針還可以兼容免疫熒光或者內源熒光蛋白標記過程，可進行多色成像。

使用488激光器或者近似波長激發，495 波長發射光收集信號。

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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。