Bluo-Gal β-半乳糖苷酶顯色底物（藍色）

【參數信息】

英文名稱：Bluo-Gal β-半乳糖苷酶顯色底物（藍色）

中文名稱：5-溴-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

CAS NO：97753-82-7

化學名：5-bromo-1H-indol-3-yl β-D-galactopyranoside

分子式：C14H16BrNO6

分子量：374.2 g/mol

外觀：類白色粉末

溶解性：溶于DMF，DMSO

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產廠商：西安強化生物科技

【簡單概述】

Bluo-Gal是β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）的一種顯色底物，屬于鹵代吲哚基-β-半乳糖苷類化合物。

Bluo-Gal β-半乳糖苷酶顯色底物（藍色）是傳統底物X-Gal的替代品，能產生較深的藍色沉淀，適用于組織化學檢測、藍白篩選等場景。

顯色原理：

Bluo-Gal是β-半乳糖苷酶的顯色底物，被酶水解后生成不溶于乙醇和二甲苯的深藍色沉淀，顯色效果比傳統底物X-Gal深。

適用于檢測表達β-半乳糖苷酶的細菌、病毒斑、組織切片或細胞。

可與鏈霉親和素-β-半乳糖苷酶偶聯物聯用，用于免疫印跡和免疫細胞化學分析。

【實驗流程（分場景）】

【場景一】：細菌菌落篩選（藍白斑實驗）

培養基準備：

將Bluo-Gal加入瓊脂培養基中，終濃度至少300µg/ml。

培養基pH需調至7.0-8.0，冷卻至45-55°C后再加入Bluo-Gal，避免高溫降解。

可添加IPTG誘導lacZ基因表達。

接種與觀察：

涂布細菌后，37°C培養12-24小時。

lac?菌落：呈現深藍色；lac?菌落：無色或白色。

【場景二】：細胞或組織染色（衰老檢測/免疫分析）

樣本處理：

固定：用β-半乳糖苷酶固定液，室溫固定15分鐘。

洗滌：PBS清洗3次，每次3分鐘，去除固定液殘留。

染色工作液配制：

按比例混合染色液。

關鍵條件：

pH需調至6.0（衰老檢測）或7.0-8.0（其他應用）。

禁用CO2培養箱：避免pH波動影響顯色。

染色與觀察：

加入染色工作液覆蓋樣本，37°C避光孵育過夜。

棄染色液，PBS清洗后，用光學顯微鏡觀察：

陽性細胞/組織：深藍色顆粒。

輔助步驟：可加核固紅染核增強對比。

【場景三】：免疫印跡/免疫細胞化學

樣本處理：

常規電泳或細胞固定后，與鏈霉親和素-β-半乳糖苷酶偶聯物孵育。

顯色：

加入Bluo-Gal工作液，室溫反應至藍色條帶/沉淀出現。

終止反應后觀察，沉淀不溶于有機溶劑。

【相關試劑】

DL-Propargylglycine

GYY 4137 (H2S Donor)

N-Acetyl-L-Cysteine (NAC)

Fluo-4?Pentapotassium?Salt

EGTA AM,CalciumChelator

Rhod-5N AM，Cell Permeant

Cell Explorer 活細胞標記試劑盒

Cell Meter 細胞活性檢測試劑盒

MitoTEMPOL線粒體靶向SOD模擬物

Ethidium Homodimer 1 (EthD-1)

Hydroxystilbamidine(FluoroGold)

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。