脫氫表雄酮(DHEA)定量檢測試劑盒

脫氫表雄酮(DHEA)是人體一種內源類固醇激素(Anabolic steroids)也有合成藥劑，是運動興奮禁用物質檢測的熱點。

【產品名稱】

通用名稱：脫氫異雄酮檢測試劑盒（酶聯免疫法）

英文名稱：DHEA ELISA

【產品規格】

96T

【預期用途】

此脫氫表雄酮(DHEA)定量檢測試劑盒是酶免法，可用于人血清中脫氫異雄酮的體外定量檢測。

【前言簡介】

脫氫異雄酮是19C的類固醇激素，由腎上腺皮質產生，極少量的由性腺產生。DHEA是睪酮和雌激素合成的前體，由于17-oxo的存在，脫氫異雄酮與雄性激素活性有關聯，只有10%的睪酮是由其產生的，然而在新生兒和成年婦女體內，脫氫異雄酮含量比睪酮高出數倍，周邊組織也迅速合成雄性激素（雄烯二酮和睪酮），還有可能會產生雌性激素。而且脫氫異雄酮與性激素和球蛋白的連接有關系，這些因素都可能增加DHEA的生物效能。

脫氫異雄酮的生理方面的作用還沒有確切的定義，在體內的影響包括，對細胞增殖的影響和細胞新陳代謝的影響。同時也有研究提到DHEA可能對膽DAN固醇，脂代謝，胰島素敏感度，分泌和免疫功能有影響。在精神分裂癥和肥胖癥患者體內的DHEA水平時不正常的。DHEA治療已提出一些情況，包括肥胖癥和心血管疾病。

【檢測原理】

此脫氫表雄酮(DHEA)定量檢測試劑盒是酶免法中的競爭法原理。微孔板上包被有多克隆抗體。樣品中的內源性抗原和酶標抗原競爭結合包被在微孔中的抗原的結合位點。溫育之后，清洗微孔以終止反應。加入底物液后，顏色強度與樣品中的抗原的量成反比。

【試劑盒組成成分】

微孔板          1×12×8     

包被有抗DHEA抗體（多克隆）

標準品          6×1ml       

即用； 0、0.37、1.1、3.3、10、30 ng/ml

質控品          2×1ml

即用型、具體濃度見質控單               

酶聯物          1×13mL    

含辣根過氧化物酶標記的DHEA，防腐劑

底物液          1×15mL     

即用型、內含TMB

終止液          1×15mL  

含1M硫酸，避免接觸終止液，會刺激和灼傷皮膚

洗滌液          1×100mL  

10倍濃縮

所需材料（未提供）

1) 移液器    體積：50；100；200μL

2) 計時器

3) 酶標儀

4) 雙蒸水或去離子水

5) 線性-對數坐標紙或數據處理軟件

【儲存條件】

試劑盒必須儲存于2-8°C的環境中，可至有效期，不要使用過期的試劑。開封微孔板用包裝袋密封保存在2-8°C環境下時，可保存8周

【樣品要求】

實驗需使用血清樣本

不要使用脂血、溶血、黃疸血的樣本

含疊DAN化鈉的樣本不能用于檢測

樣本采集

采用靜脈穿刺采集血液樣本，允許血液凝集，通過離心分離血清。

樣本儲存

2~8℃下可保存24小時。要保存更長時間需保存在-20℃環境下（12個月）

樣品稀釋

樣本濃度高于最高標準品時，需使用零標準品進一步稀釋，計算時乘以稀釋因子。稀釋方法如下：

A  1：10    10ul血清樣品+90ul 零標準品（充分混合）

B  1：100   10ul稀釋液A +90ul零標準品（充分混合）

 【檢測方法】

試劑準備

洗滌液：用900ml蒸餾水將100ml洗滌濃縮液稀釋成1000ml最終體積。室溫下2周穩定。

檢測步驟

1) 將所需數量的板條置于板架上

2) 將20μL標準品、質控品和樣品分別加入到微孔板相應的微孔中。

3) 在每一微孔中加入100μL酶聯物，充分混合10秒，在這一步驟中充分混合非常重要

4) 室溫下溫育60分鐘

5) 倒去孔內反應液，每孔加入250μL洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干

6) 每孔加入100μL的底物液

7) 室溫下溫育15分鐘

8) 每孔加入100μL終止液終止反應

9) 15min之內用酶標儀檢測。

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