篤瑪 牛補體因子4 （C4） ELISA 試劑盒

篤瑪  牛補體因子4 (C4) ELISA 試劑盒  產品介紹

樣品測定

1． 移取xx微升 去干擾液（Reagent C）到上述待測樣品或標準樣品管里，混勻
2． 加入xx微升 反應液（Reagent D）
3． 加入xx微升 顯色液（Reagent E），混勻
4． 室溫下孵育20分鐘
5． 放進微型臺式離心機離心3分鐘，速度為5000g
6． 移取1毫升上清液到比色皿
7． 即刻放進分光光度儀檢測，獲得待測樣品和標準樣品讀數


篤瑪  牛補體因子4 (C4) ELISA 試劑盒  產品介紹

樣品準備

1． 手術取出動物組織，并秤重以確定200毫克組織重量 
2． （選擇步驟）放進預冷的15毫升錐形離心管
3． （選擇步驟）加入xx毫升 清理液（Reagent A）清洗1次
4． 即刻用刀片切碎組織
5． 放進一個預冷的15毫升錐形離心管
6． 加入預冷的xx毫升 清理液（Reagent A）
7． 渦旋震蕩5秒，充分混勻
8． 即刻放入預冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用勻漿棒勻化組織（約40至80下）
9． 將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管
10． 放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g
11． 移取500微升到新的1.5毫升離心管
12． 加入xx微升 穩定液（Reagent B），混勻
13． 放在冰槽里待測（注意：須1周內使用）
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標本要求
1. 血清：
室溫血液自然凝固10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保
存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
2. 血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，離心20
分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。
3.尿液：
用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀
形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。
5.培養細胞:
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100 萬/ml 左右。
通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20 分鐘左
右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
6.組織標本:
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化
后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻
漿器將標本勻漿化。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢
測，其余冷凍備用。
7.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進
行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融