Streptavidin-CY5,Cy5標記-鏈霉親和素

Streptavidin-CY5,Cy5標記-鏈霉親和素

• 鏈霉親和素(SA)簡述：

  鏈霉親和素(SA)是Streptomyces avidinii菌的分泌物，其分子量及結合生物素的能力與雞蛋清中的親和素相似，等電點6.0，非特異性結合遠比親和素低。

  鏈霉親和素(SA)的來源：

  SA 是Streptomyces avicllrdi菌培養過程中的分泌產物，主要通過2一亞氨基生物索親和層析法提純，1L培養液中含蛋白10~60mg。鏈霉親和素是四聚體蛋白，大小為66KDa。一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結合，兩者之間的親和力極為強烈。

  鏈霉親和素(SA)的應用：

  enzyme immunoassays, 酶免疫測定

  immunohistochemistry, 免疫組織化學

  flow cytometry, 流式細胞儀

  Western blot, 原位雜交

  immunoblotting procedures免疫印跡程序

  Western blot免疫印跡

  鏈霉親和素(SA)的熒光標記物及激發波長：

  熒光染料	顏色	Ex（nm）	Em（nm）
  FITC	綠色	490	525
  TRITC	黃色	547	572
  Cy3	黃色	555	570
  Cy5	紅色	646	620
  Cy7	深紅色	750	773

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熒光標記的鏈霉親和素(SA)的介紹：

FITC-Streptavidin：

FITC是廣泛使用的熒光基團，但其的缺點是淬滅快，使用抗淬滅劑可以減輕。

花青染料（Cy2,Cy3,Cy5,Cy7-Streptavidin）：

Cy2比FITC更穩定，且在表面熒光顯微鏡下，Cy2的熒光FITC更強。Cy3和Cy5比大多數熒光基團更亮，更穩定，背景更弱。二者常在共聚焦顯微實驗中作多標記。但Cy5的缺點是不能用表面熒光顯微鏡觀察，因此通常用具有遠紅外檢測器的共聚焦顯微鏡觀察。

TRITC-Streptavidin:

TRITC,RRX,TR:TRITC經常和FITC一起用于雙標記實驗中，也可以使用RRX或TR，但TR會產生較高的背景。在使用裝有氪氫燈的激光共聚焦掃描顯微鏡作三標記實驗時，RRX尤其有用，可以和Cy2（或FITC）及Cy5一起使用，因為RRX的發射波長在Cy2和Cy5中間，且和這兩者的重疊很少。