人中性粒細胞堿性磷酸酶（NAP）ELISA試劑盒

:

本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷,具體說明書請客服索取，本說明書是通用模板，

人中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)ELISA試劑盒人中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)ELISA試劑盒人中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)ELISA試劑盒

使用說明書

檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被樣本抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的樣本呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1.  血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或gan素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3.  細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.  組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1.酶標儀（450nm）
2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
操作注意事項
1.  試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶*溶解后再使用。
2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3.  濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，zui終結果乘以5才是樣本實際濃度。
4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5.  所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成
名稱    96孔配置    48孔配置    備注
微孔酶標板    12孔×8條    12孔×4條    無

檢測抗體-HRP    10mL    5mL    無
20×洗滌緩沖液    25mL    15mL    按說明書進行稀釋
底物A    6mL    3mL    無
底物B    6mL    3mL    無
終止液    6mL    3mL    無
封板膜    2張    2張    無
說明書    1份    1份    無
自封袋    1個    1個    無
注：標準品濃度都不相同，麻煩客服索取相應說明書
試劑的準備
 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法
1.  手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。
2.  自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步驟
1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
結果判斷
 繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

試劑盒性能
1. 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。
2. 靈敏度：zui低檢測濃度小于（參考說明書）
3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性：板內、板間變異系數均小于15%。
5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6個月
免責聲明
1.  試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
  嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。?

相關產品*：

人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA試劑盒
人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒
人腺病毒IgM(ADV-IgM)ELISA試劑盒
人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒
人輪狀病毒(RV)IgM ELISA試劑盒
人艾柯病毒IgM(ECHO IgM)ELISA試劑盒
人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA試劑盒
人柯薩奇病毒IgM(Cox V-IgM)ELISA試劑盒
人柯薩奇病毒IgG(Cox V-IgG)ELISA試劑盒
人結核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)ELISA試劑盒
人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒
人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA試劑盒
人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA試劑盒
人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)ELISA試劑盒
人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA試劑盒
人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒
人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒
人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA試劑盒
人丁型肝炎IgG(HDV IgG)ELISA試劑盒
人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒
人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA試劑盒
人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒
人去氨加壓素/1-去氨基-8-右旋-精氨酸加壓素(dDAVP)ELISA試劑盒
人毒蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒
人睪酮受體(TR)ELISA試劑盒
人毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒 
人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒
人抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒
人食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒
人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒 
人鈣調素(CAM)ELISA試劑盒 
人真胰島素(TI)ELISA試劑盒 
人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)ELISA試劑盒
人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒 
人反三碘甲狀腺原氨酸(rT3)ELISA試劑盒 
人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒