APDye Fluor 405 Alkyne ：可用于含疊氮基團的生物分子的熒光標記

◆ 走進 APDye 405 炔烴

APDye 405 炔烴（APDye 405 Alkyne）屬于一類藍色熒光標記探針，將 APDye 405 熒光染料的優(yōu)良光學(xué)性能與炔烴官能團（-C≡CH）的點擊化學(xué)反應(yīng)活性相結(jié)合，在蛋白質(zhì)標記、核酸修飾及糖類代謝標記等基礎(chǔ)科研場景中具有廣泛應(yīng)用。該試劑的核心結(jié)構(gòu)由兩部分構(gòu)成：藍色熒光染料 APDye 405 和炔烴反應(yīng)基團。

APDye 405 是一種水溶性良好的藍色熒光染料，其光譜特征與 Alexa Fluor® 405 和 DyLight® 405 高度相似。該染料屬于磺化芘類熒光團，激發(fā)峰位于約 402 nm，發(fā)射峰位于約 424 nm，與 405 nm 紫光激光器匹配良好，適用于多色流式細胞術(shù)和 STORM 超分辨顯微成像等應(yīng)用。其熒光強度在 pH 4 至 10 的較寬范圍內(nèi)保持穩(wěn)定，這為在不同實驗條件下進行標記提供了便利。

炔烴官能團是該試劑的反應(yīng)活性中心，可在銅（I）催化的疊氮-炔烴環(huán)加成反應(yīng)（CuAAC，即經(jīng)典的點擊化學(xué)反應(yīng)）中與含疊氮基團的生物分子高效偶聯(lián)，形成穩(wěn)定的三唑連接橋。這一反應(yīng)具有高度的生物正交性，不與天然生物分子中的官能團發(fā)生非特異性反應(yīng)，確保了標記過程的選擇性和精準性。

在基礎(chǔ)科研場景中，該試劑可用于含疊氮基團的生物分子的熒光標記，適用于細胞表面聚糖代謝標記追蹤、蛋白質(zhì)的位點特異性修飾以及核酸的末端標記等方向。

◆ 核心參數(shù)速覽

中文名稱：APDye 405 炔烴、APDye 405 炔基、藍色熒光染料 APDye 405 炔烴、APDye 405 標記炔烴、磺化芘類熒光染料-炔烴

英文名稱：APDye 405 Alkyne, APDye 405 Alkynyl, APDye 405-Alkyne, APDye Fluor 405 Alkyne, 405 nm Alkyne Fluorescent Dye

外觀/性狀：黃色至灰黃色固體粉末

純度：≥95%

溶解性：易溶于水、DMSO、DMF

保存條件：-20°C避光、干燥密封保存

激發(fā)/發(fā)射波長：約402 nm（激發(fā)）/ 約424 nm（發(fā)射）

適用儀器：流式細胞儀（405 nm 激光器）、共聚焦顯微鏡、STORM 超分辨顯微鏡、熒光酶標儀

科研實驗室：西安凱新生物

結(jié)構(gòu)式：

◆ 性能亮點

該試劑的核心優(yōu)勢在于將 APDye 405 染料穩(wěn)定的藍色熒光與炔烴點擊化學(xué)的高效反應(yīng)性進行了有效結(jié)合。APDye 405 的消光系數(shù)達到 35,000 cm?1M?1，能夠提供明亮的熒光信號，其在寬 pH 范圍內(nèi)熒光強度的一致性為多色實驗中的精確量化提供了可靠保障。與傳統(tǒng)的生物素-親和素檢測體系相比，點擊化學(xué)標記具有反應(yīng)體積小、標記位點可控、背景信號低等優(yōu)勢。該試劑的炔烴基團在生理條件下具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性，在儲存和使用過程中不易發(fā)生非特異性反應(yīng)，確保了標記反應(yīng)的高選擇性和實驗結(jié)果的可靠性。在需要對銅離子敏感的體系中，也可選用無銅點擊化學(xué)版本（如 APDye 405 DBCO）作為替代方案。

◆ 應(yīng)用場景

該試劑主要適用于含疊氮基團生物分子的熒光標記、細胞表面聚糖代謝標記追蹤以及蛋白質(zhì)位點特異性修飾等基礎(chǔ)科研場景。具體應(yīng)用中，可通過 CuAAC 點擊反應(yīng)將 APDye 405 Alkyne 與預(yù)先引入疊氮基團的目標分子在溫和條件下偶聯(lián)，經(jīng)純化后利用流式細胞術(shù)或熒光顯微鏡檢測目標分子的熒光信號。在聚糖代謝標記研究中，該試劑可用于追蹤疊氮標記糖在細胞表面的摻入和動態(tài)變化。該探針的藍色熒光特性使其在與綠色（如 FITC）、橙紅色（如 Cy3）等其他熒光染料聯(lián)合使用時，能夠?qū)崿F(xiàn)多色同時檢測，適用于復(fù)雜的多參數(shù)實驗設(shè)計。

◆ 操作與安全須知

該試劑對光敏感，操作及保存全過程建議在避光條件下進行。推使用后的試劑及接觸過的耗材應(yīng)按相關(guān)化學(xué)廢棄物處理規(guī)范進行處置。

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◆ 聲明

溫馨提示：本試劑僅面向科研場景，由西安凱新生物有限公司 YNN 匯編整理。