人協(xié)同刺激分子受體（CMR）ELISA試劑盒

上海博麥德生物技術有限公司是一家與美國合資的企業(yè)，并從事專業(yè)ELISA試劑盒，人ELISA試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒，豬ELISA試劑盒等各種屬ELISA試劑盒集科研與生產為一體專業(yè)性的生物技術公司。

GS-E30123 人協(xié)同刺激分子受體（CMR）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30124 大鼠細胞色素P4502E1（CYP2E1）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30125 大鼠α1微球蛋白（α1-MG）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30126 大鼠單核細胞趨化蛋白4（MCP-4/CCL13）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30127 大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α（PPAR-α）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30128 大鼠鈣調素（CAM）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30129 大鼠載脂蛋白E（Apo-E）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30130 大鼠網膜素（omentin）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30131 大鼠孤腓肽（OFQ/N）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30132 大鼠蛋白磷酸酶（PP）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30133 大鼠硫氧還蛋白還原酶（TrxR）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30134 大鼠硫氧化還原蛋白（Trx）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30135 大鼠膠原酶II（Collagenase II）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30136 大鼠髓系細胞觸發(fā)受體-1（TREM-1）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30137 大鼠膠原酶I（Collagenase I）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30138 大鼠磷酸化蛋白激酶C（P-PKC）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30139 大鼠磷酸化細胞外信號調節(jié)激酶（pERK）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30140 大鼠組織蛋白酶K（cath-K）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30141 大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1（AmAC-1）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30142 大鼠骨形成蛋白（BMPs）ELISA試劑盒 96T/48T
GS-E30143 大鼠視黃醇結合蛋白4（RBP-4）ELISA試劑盒 96T/48T
試劑盒組成：

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟：

1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為24ng/L，16ng/L ，8ng/L，4ng/L，2ng/L）。

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

注意事項：

1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2． 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3． 各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，*使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6． 底物請避光保存。

7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9． 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，    在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。                  

試劑盒性能：

1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.92以上。

2.批內與批間應分別小于9%和15%

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

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